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核酸检测是诊断新冠状肺炎的“黄金标准”，检测过程中的每一个环节都是微妙的，不能有任何疏忽。
最近，在武汉，检查员正在检查采集样本的标本信息。新华社记者成敏摄
在广东省第二人民医院P3实验室的标本处理室，研究人员正在进行开盖和核酸提取。受访者提供了照片。
核酸检测是新诊断肺炎的“金标准”，检测过程中的每一个环节都是微妙的，不能有任何疏忽。
“这是一个‘零距离’接触病毒的地方。整个实验室完全封闭，房间处于负压状态。我们喜欢用“三种流动”来描述它，即人员、货物和空气的单向流动，以确保里面的污染物不会泄漏出去并造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林建国说。这里他指的是P3实验室(生物安全三级实验室)。广东省第二人民医院每天进行400多项新的冠状病毒核酸检测。
现在，让我们揭开广东省第二人民医院P3实验室的神秘面纱，看看病毒是如何在这里被“发现”的。
检测过程的每一个环节都是一项出色的工作。
核酸检测是新诊断肺炎的“金标准”，检测过程中的每一个环节都是微妙的，不能有任何疏忽。
实验室中的检测过程可分为五个步骤:样品进入“转移窗口”——灭活处理——无盖样品添加和核酸提取——扩增反应判断结果——高压灭菌。
在第一步中，采集的测试样本，如咽喉拭子或肛门拭子，在进入P3实验室之前必须进入一个特殊窗口——“转移窗口”。这个窗口也被称为空气锁，空空气锁，顾名思义，它与空空气有关。该转移窗口有一个不能同时打开的双门，以确保样品转移过程中引入的空气体被隔离在双门内，以确保实验室外的环境不受污染。这也是“三流”中的“物流”，样本从这里开始在实验室中短暂的生命。
第二步，样品在水浴箱中于56℃灭活半小时，使病毒蛋白不再具有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力，使实验者在检测样品时相对安全，但病毒蛋白的基因序列不受影响。
第三步是进行解封闭和核酸提取。
在第四步中，将提取的核酸送到核酸检测室，并且即将安装仪器。将提取的核酸加入扩增试剂中，通过荧光聚合酶链反应仪进行逆转录聚合酶链反应，首先将提取的核酸反转录成DNA，然后以该DNA为模板，扩增特定位点，在不同温度下进行变性、退火和延伸，每个周期收集荧光值，45个周期后绘制荧光曲线，时间约为110分钟，实验者根据荧光曲线分析判断阴性和阳性结果。
第五步是根据高压灭菌后的相关常见医疗垃圾对实验过程中产生的污物进行处理。“物流”到此结束。
测试结果经过了多次比较和评论。
任何环节的问题都可能导致检测结果的错误。因此，为了保证测试质量，测试结果将经过多次比较和评审。
据介绍，检测质量的保证措施在检测前就已经开始了。采集样本的医务人员在上岗前必须经过严格的培训和考核。样品的质量与采集技术密切相关。每个行动过程都必须按照规定进行。样品采集完成后的护送工作也必须由专门人员按照严格的程序送到实验室。
在测试过程中，实验者始终保持谨慎的态度进行每一项测试，不遗漏任何可疑样品，并选择不同的试剂对可疑样品进行复检和确认。其次，根据程序，对于每一批实验，将随机插入三个以上空的白色对照，并且将对阳性样品的病毒基因进行测序和比较，以防止“假阳性”的发生。
测试后，实验室还将定期随机选择测试样本，并将其发送至第三方实验室进行测试和数据对比分析。同时，实验室还将参与卫生部和广东省临床中心的实验室间评估，以确保检测的准确性。
病毒“侦察兵”在他们的生意中是能干和英勇的。
在操作过程中，实验者面对他面前的样本，需要“一个一个地打开盖子，加入样本并提取核酸”。这无疑是与病毒的直接对抗。核酸检测的目的是高效、有序和安全。其中，安全是最重要的，尤其是实验室技术人员的安全。
因此，为了进入P3实验室，实验室技术人员应首先在清洗区穿上中间防护服，通过缓冲室进入实验室负压工作间，在此进行标本处理、核酸提取和检测，完成后进行空室和表面消毒，然后依次脱下防护服，在淋浴室换好衣服，返回清洗区。这些步骤必须严格执行，不可遗漏。
目前，广东省第二人民医院P3实验室检测组有21人，实行三班制。在疫情爆发阶段，为了满足检测要求，缩短检测时间，实验室在原有团队的基础上，从风湿科、血液学科等科室的实验室抽调人员。这些病毒“侦察兵”中有70%以上拥有硕士或以上学位，受过分子生物学培训，并拥有聚合酶链反应证书。
实验室严格遵守“新型冠状病毒诊断和治疗计划”和生物安全要求。测试人员应在P3实验室的负压密封室内穿戴三级防护设备。为了解决上厕所的问题，他们不得在5小时内吃喝，甚至不得穿成人尿布。他们应随时面对负压差和设备紧张引起的头晕、呕吐等症状。
“与病房里的医护人员不同，他们躲在实验室里，每天都与病毒密切接触。他们是人们看不到的“前线”林建国说。
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生物安全防护实验室分为几个级别
生物安全防护实验室是指实验室的结构和设施、安全操作程序和安全设备，以确保工作人员在处理病原微生物及其毒素时不会被实验对象感染，并确保周围环境不受污染。
根据被处理微生物及其毒素的危害程度，生物安全防护实验室分为四个级别，第一级最低，第四级最高。生物安全一级实验室通常适用于对健康成人没有致病作用的微生物。第二级适用于对人类和环境具有中等潜在危害的微生物；第三级适用于主要通过呼吸道感染人的致病微生物或其毒素，这些人患有严重甚至致命的疾病。四级适用于对人体高度危险、通过气溶胶途径或未知传播途径传播、且没有有效疫苗或治疗方法的病原微生物或其毒素。
20世纪80年代，为了研究流行性出血热病毒的传播机制，中国建立了第一个P3实验室。2003年非典疫情是中国高水平生物安全实验室发展的分水岭。非典爆发后，中国出台了国家生物安全实验室建设体系计划。一些P3实验室已经投入运行，P4实验室已经建成。
2015年1月31日，中国第一个P4实验室——中国科学院武汉国家生物安全实验室在武汉建成。2018年1月4日，通过国家卫生计划委员会(现为国家卫生安全委员会)对高致病性微生物实验活动的现场评估，该实验室成为中国乃至亚洲第一个正式投入运行的P4实验室。
目前，世界上P4实验室的建设正呈现出加快的趋势。这与全球化时代致命传染病的危险有关，也与国家生物安全战略有关。据不完全统计，已知22个国家和地区的60个机构拥有P4实验室。然而，一些国家没有披露数据，因为P4实验室的相关内容涉及国家生物安全的核心机密。
经过多年的发展，中国现已拥有数十个P3和P4实验室，为预防和控制烈性传染病和重大传染病、生物预防和工业发展做出了重要贡献。(记者龙跃梅通讯员陈淑桦王蒙)
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